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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 保存條件 | 低溫冷藏 |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | E0536 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 組織來(lái)源 | 肺微血管；內(nèi)皮細(xì)胞 |
| 細(xì)胞形態(tài) | 詳見說(shuō)明書 |
| 是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
| CAS編號(hào) | |
| 保質(zhì)期 | 詳見說(shuō)明書 |
| 器官來(lái)源 | 詳見說(shuō)明書 |
| 免疫類型 | 詳見說(shuō)明書 |
| 品系 | 詳見說(shuō)明書 |
| 生長(zhǎng)狀態(tài) | 貼壁 |
| 物種來(lái)源 | 人 |
| 包裝規(guī)格 | 1×106 |
| 純度 | 詳見說(shuō)明書% |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)稱：HLMVEC 細(xì)胞
中文名稱：人肺微內(nèi)皮細(xì)胞
規(guī)格：1×106
種屬：人
來(lái)源：肺微；內(nèi)皮細(xì)胞
培養(yǎng)基：DMEM
狀態(tài)：貼壁
單位:T25/瓶
貨號(hào)：E0536
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
HLMVEC 細(xì)胞 | 1×106 | E0536 |
帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇：從培養(yǎng)量大小來(lái)講，從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等，更大就是反應(yīng)器了。
帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等，一般都經(jīng)過(guò)表面改性處理，適合細(xì)胞貼壁和生長(zhǎng)。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用（如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等），75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用（一般性的傳代，保存細(xì)胞，為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等），25ml一般是用來(lái)復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng)，還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng)：
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%（過(guò)量不足，過(guò)晚細(xì)胞狀態(tài)不佳，1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng)，一般1:3至1:5細(xì)胞一代，即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時(shí)間，非細(xì)胞有絲分裂次數(shù)）時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶（注意：消化液的量以蓋住細(xì)胞*，*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度）進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入lml凍存液（90%胎牛血清，10% DMSO。
一般來(lái)講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整，凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)，另一方面可以在細(xì)胞凍存過(guò)程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì)，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞），放入凍存管內(nèi)（管內(nèi)有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入4oC冰箱中凍存30min，然后放入-20oC冰箱中凍存30min，再置于-80℃冰箱內(nèi)過(guò)夜。
*天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個(gè)月。
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
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Salpha羥基表藤黃酸 HPLC≥95% 20mg 3′端DNA生物素轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記試劑盒10
羥基藤黃酸 HPLC≥95% 20mg Mousedopamine,DAELISA試劑盒小鼠多巴胺(DA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
雷公藤新堿 HPLC≥95% 20mg 小鼠細(xì)胞色素C(CYCS)ELISA試劑盒 ，英文名： CYCS ELISA Kit
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洋地黃蒽醌 HPLC≥95% 20mg 牛血清白蛋白(BSA)試劑盒 Bovine serum albumin,BSA ELISA kit
O苯甲酰戈米辛O HPLC≥95% 20mg 英文名稱HumanHRAbIgGELISAKit人抗心肌抗體IgG(HRAbIgG)規(guī)格：96T/48T
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Triptonine B HPLC≥95% 20mg RatOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPELISA試劑盒大鼠骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
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CD53 Others Mouse 小鼠 CD53 (aa 107-181) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) Fmoc-纈氨醇 Fmoc-Valinol質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR
組織源性原代細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)/1mlL-賴氨酸鹽酸鹽H-Lys-OH.HCl質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
GT1.1細(xì)胞，小鼠細(xì)胞(分泌促生長(zhǎng)激素分泌激素) 人細(xì)胞系,Anglne細(xì)胞 人骨骼肌細(xì)胞裂解物HSkMCLL-鳥氨酸鹽酸鹽L-Ornithine monohydrochloride質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
恒河猴腎細(xì)胞;LLC-MK2L-天門冬氨酸L-Aspartic acid質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
IFNW1 Others Human 人 Ierferon omega-1 / IFNω / IFNW1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) L-天門冬氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品)L-Aspartic acid質(zhì)量規(guī)格：>99%(T),標(biāo)準(zhǔn)品
HLMVEC 細(xì)胞恒河猴腎細(xì)胞;MMK3 人樣Butt瘤細(xì)胞，EB-3[EB3]細(xì)胞 TE-11(細(xì)胞)(-)-鹽酸東莨菪堿(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.0%(?)-Scopolamine hydrochloride
人急性早幼粒細(xì)胞;HL-60十四烷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)Tetradecane
EFNA3 Others Human 人 EphrinA3 / EFNA3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 苯駢三氮唑（BTA,1,2,3-苯駢三氮唑)質(zhì)量規(guī)格：AR,分析1H-Benzotriazole
CM-H004人肺大內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL鹽酸倍他司汀質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRBetahistine Dihydrochloride
SUSD4 Others Human 人 SUSD4 / Sushi domain-coaining 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 鹽酸倍他司汀（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Betahistine Dihydrochloride
注意事項(xiàng)：
HLMVEC 細(xì)胞（1）預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；
（2）用75%酒精擦拭經(jīng)過(guò)紫外線照射的超凈工作臺(tái)和雙手；
（3）正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且減少污染；
（4）點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太小；
（5）嚴(yán)格的無(wú)菌操作；
（6）貼壁細(xì)胞消化適度：消化的時(shí)間受消化液的種類、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過(guò)程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化；
（7）傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作，每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染；
（8）傳代細(xì)胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。
