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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 保存條件 | 低溫冷藏 |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | E0793 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 組織來(lái)源 | 角膜；上皮細(xì)胞 |
| 細(xì)胞形態(tài) | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
| 是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
| CAS編號(hào) | |
| 保質(zhì)期 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
| 器官來(lái)源 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
| 免疫類型 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
| 品系 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
| 生長(zhǎng)狀態(tài) | 貼壁 |
| 物種來(lái)源 | 人 |
| 包裝規(guī)格 | 瓶 |
| 純度 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)% |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)稱：HCEpiC細(xì)胞
中文名稱：人角膜上皮細(xì)胞
規(guī)格：瓶
種屬：人
來(lái)源：角膜；上皮細(xì)胞
培養(yǎng)基：DMEM
狀態(tài)：貼壁
單位:
貨號(hào)：E0793
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
HCEpiC細(xì)胞 | 瓶 | E0793 |
帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇：從培養(yǎng)量大小來(lái)講，從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等，更大就是反應(yīng)器了。
帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等，一般都經(jīng)過(guò)表面改性處理，適合細(xì)胞貼壁和生長(zhǎng)。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用（如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等），75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用（一般性的傳代，保存細(xì)胞，為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等），25ml一般是用來(lái)復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng)，還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng)：
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%（過(guò)量不足，過(guò)晚細(xì)胞狀態(tài)不佳，1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng)，一般1:3至1:5細(xì)胞一代，即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時(shí)間，非細(xì)胞有絲分裂次數(shù)）時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶（注意：消化液的量以蓋住細(xì)胞*，*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度）進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入lml凍存液（90%胎牛血清，10% DMSO。
一般來(lái)講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整，凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)，另一方面可以在細(xì)胞凍存過(guò)程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì)，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞），放入凍存管內(nèi)（管內(nèi)有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入4oC冰箱中凍存30min，然后放入-20oC冰箱中凍存30min，再置于-80℃冰箱內(nèi)過(guò)夜。
*天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個(gè)月。
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
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釓標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000μg/mL,基體：10%HCl） Gadolinium standard 質(zhì)量規(guī)格：1000μg/mL,基體：10%HCl DNA清除試劑盒20
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鈥標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000μg/mL,基體:10%HCL） Holmium solution 質(zhì)量規(guī)格：1000μg/mL,基體:10%HCL 小鼠球蛋白A(IgA)ELISA 試劑盒
鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000μg/ml,介質(zhì)：1.0mol/L 硝酸） Iron resolution 質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml,介質(zhì)：1.0mol/L 硝酸 Rat collagenase I (Collagenase I) ELISA Kit 大鼠膠原酶I(Collagenase I)ELISA試劑盒
鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000mg/L,溶劑：5%鹽酸） Iron solution 質(zhì)量規(guī)格：1000mg/L,溶劑：5%鹽酸 HumanAgoiRelatedProtein,AGRPELISAKit 人Agoi相關(guān)蛋白(AGRP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
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銦標(biāo)準(zhǔn)溶液（100mg/L(20℃)，基體：1％HCl） Indium standard 質(zhì)量規(guī)格：100mg/L(20℃)，基體：1％HCl 小鼠密封蛋白(OCLN)ELISA試劑盒 ，英文名： OCLN ELISA Kit
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-C;Vero-HCV-C1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷-1,4,7,10-四乙酸三叔丁酯(>97.0%(T))Tri-tert-butyl 1,4,7,10-Tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetate質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(T)
人骨骼肌星形細(xì)胞(HSkMSC)(5×105)4-叔丁基杯[8]芳烴(>98.0%(HPLC))4-tert-Butylcalix[8]arene質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)
CL-0235TSCCa(人舌鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×21,4,5,6-四氫-5,6-二氧-2,3-吡嗪二甲腈(>98.0%(HPLC)(T))1,4,5,6-Tetrahydro-5,6-dioxo-2,3-pyrazinedicarbonitrile質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)
人急性T細(xì)胞性細(xì)胞;I 2.1(CRL-2572) 大鼠腦膜細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL1-氮雜-15-冠-5-(>98.0%(T))1-Aza-15-crown 5-Ether質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)
NG108-15 大鼠小鼠雜合神經(jīng)細(xì)胞1-氮雜-18-冠-6-(>98.0%(GC)(T))1-Aza-18-crown 6-Ether質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T)
HCEpiC細(xì)胞INS-1(大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2馬來(lái)酸羅格列酮質(zhì)量規(guī)格：>99.0%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Rosiglitazone Maleate
A172(人腦細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H107人軟骨細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL 人胚腎二倍體細(xì)胞;CCC-HEK-1馬來(lái)酸羅格列酮（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Rosiglitazone Maleate
CM-R031大鼠腸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL分子篩, 5 ?(40-60目,氣相、液相色譜柱專用)質(zhì)量規(guī)格：40-60目,氣相、液相色譜柱專用Molecular sieves, 5 ?
HA Others H7N9 甲型 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 分子篩, 5 ?(60-80目,氣相、液相色譜柱專用)質(zhì)量規(guī)格：60-80目,氣相、液相色譜柱專用Molecular sieves, 5 ?
人卵巢微內(nèi)皮細(xì)胞HOMEC分子篩, 5 ?(80-100目,氣相、液相色譜柱專用)質(zhì)量規(guī)格：80-100目,氣相、液相色譜柱專用Molecular sieves, 5 ?
注意事項(xiàng)：
HCEpiC細(xì)胞（1）預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；
（2）用75%酒精擦拭經(jīng)過(guò)紫外線照射的超凈工作臺(tái)和雙手；
（3）正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且減少污染；
（4）點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太小；
（5）嚴(yán)格的無(wú)菌操作；
（6）貼壁細(xì)胞消化適度：消化的時(shí)間受消化液的種類、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過(guò)程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化；
（7）傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作，每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染；
（8）傳代細(xì)胞瓶口每次打開(kāi)或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。
