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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 保存條件 | 低溫冷藏 |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | AE0072 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 組織來源 | 腎；Golden Retrieve |
| 細(xì)胞形態(tài) | 貼壁 |
| 是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
| CAS編號(hào) | |
| 保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
| 器官來源 | 詳見說明書 |
| 免疫類型 | 詳見說明書 |
| 品系 | 詳見說明書 |
| 生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
| 物種來源 | 狗 |
| 包裝規(guī)格 | 1×106 |
| 純度 | % |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 狗腎惡性癥細(xì)胞直銷
簡稱：DH82
種屬：狗
來源：腎；Golden Retrieve
培養(yǎng)基：1640
狀態(tài)：貼壁
產(chǎn)品規(guī)格：1×106
單位：T25/瓶
貨號(hào)：AE0072
基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細(xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
使用方法：
收到細(xì)胞狗腎惡性癥細(xì)胞直銷后，請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
Myricadenin A 1612239-23-2 中文名： 分子式：C39H40O17 度：97.5% 關(guān)鍵詞： 小鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Mumeose K 2132384-01-9 中文名： 分子式：C25H32O15 度：93.0% 關(guān)鍵詞： 小鼠胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Monobenzone 103-16-2 中文名：莫諾苯宗 分子式：C13H12O2 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 小鼠細(xì)胞凋亡因子 (mouse Fas) 作用： ELISA 規(guī)格： 96T 美國 R&D
Momor-cerebroside I 606125-07-9 中文名： 分子式：C48H93NO10 度：95.0% 關(guān)鍵詞： 神經(jīng)酰胺; 腦苷脂; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠細(xì)胞凋亡因子配體 (mouse Fas-Ligand) 作用： ELISA 規(guī)格： 96T 美國 R&D
m-Nitrohydrocinnamic acid 1664-57-9 中文名： 分子式：C9H9NO4 度：98.0% 關(guān)鍵詞： mouse Flt3 Ligand 作用： ELISA 規(guī)格： 96T 美國 R&D
小鼠牛血清白蛋白(BSA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Furosemide 中文名： 分子式：C12H11ClN2O5S
小鼠牛小腸堿性0酸酶elisa試劑盒 小鼠牛小腸堿性0酸酶試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 小鼠牛小腸堿性0酸酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠牛小腸堿性0酸酶試劑盒、小鼠牛小腸堿性0酸酶elisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。 Ganciclovir 82410-32-0 中文名：更昔洛韋 分子式：C9H13N5O4 度：98.0% 關(guān)鍵詞：
小鼠牛小腸堿性0酸酶(CIAP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Furosemide 54-31-9 中文名： 分子式：C12H11ClN2O5S 度：98.0%
小鼠牛小腸堿性0酸酶(CIAP)ELISAKit ELISA. 96T/48T Fumaric acid 中文名： 分子式：C4H4O4 度：%
小鼠凝血因子XIII B 英文名稱： Mouse Coagulation Factor XIII B Polypeptide 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： F13B Nandrolone laurate 26490-31-3 中文名：月桂酸諾龍 分子式：C30H48O3
2-Methyl-4-(2-methylbenzoylamino)benzoic acid 317374-08-6 中文名： 分子式：C16H15NO3 CLIAKitforBeta2-GP1IgA/G/MELISAKit大鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M規(guī)格：48T/96T
7-Chloro-1,2,3,4-tetrahydrobenzo[b]azepin-5-one 160129-45-3 中文名： 分子式：C10H10ClNO 細(xì)菌營養(yǎng)瓊脂平板50個(gè)
Nicorandil 65141-46-0 中文名：尼可地爾 分子式：C8H9N3O4 RabbitEpidermalgrowthfactor,EGFELISAKit兔子表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Dronedarone 141625-93-6 中文名：鹽酸決奈達(dá)隆 分子式：C31H45ClN2O5S 豚鼠白介素10(IL10)ELISA試劑盒 ，英文名： IL10 ELISA Kit
Bisoprolol fumarate 104344-23-2 中文名：富馬酸比索洛爾 分子式：C22H35NO8 Human mannose receptor (MR) ELISA Kit 人甘露糖受體(MR)ELISA試劑盒
狗腎惡性癥細(xì)胞直銷α-Spinasterol 481-18-5 中文名：α-菠甾醇 分子式：C29H48O 度：97.0% 關(guān)鍵詞： ; 栝樓; 豆甾烷; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠抗線粒體抗體(mouse AMA) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝
α-Lipoic acid 1077-28-7 中文名：α-硫辛酸 分子式：C8H14O2S2 度：98.5% 關(guān)鍵詞： 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠抗核抗體(mouse ANA) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝
α-Lapachone 4707-33-9 中文名： 分子式：C15H14O3 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 萘醌; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠緊張素II(mouse ANG II) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝
α-D-Glucose 492-62-6 中文名：α-D-葡萄糖 分子式：C6H12O6 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 小鼠脂肪酸合成酶 英文名稱： Mouse Fatty Acid Syhase 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： FAS
中文名：佐匹克隆 分子式：C17H17ClN6O3 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 小鼠促卵泡生成激素 英文名稱： Mouse Follicle Stimulating Hormone 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： FSH
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
